2.0蘑菇王国突遭危机，库巴掳走碧琪公主，妄图掌控整片大陆。水管兄弟马里奥与路易吉即刻踏上冒险征途。他们穿梭奇幻丛林、翻越云端平台，借助超级蘑菇、火焰花突破重重机关，迎战板栗仔、食人花等敌人。兄弟二人齐心协力闯入库巴城堡，历经激战，挫败魔王阴谋，成功救出公主，守护蘑菇王国恢复和平。
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